Das Tüpfel-Johanniskraut ist in fast ganz Europa heimisch, lediglich der Norden Skandinaviens ist ausgespart. In Deutschland ist dies Johanniskraut fast überall anzutreffen: An Weg- und Waldränder, auf Böschungen und Trockenhängen, in lichten Laubwäldern, auf Wiesen, heiden, Mager- und Halbtrockenrasen, sowie als Gartenunkraut.
Das Tüpfel-Johanniskraut ist eine mehrjährige, aufrecht wachsende Stängelpflanze mit einer Wuchshöhe von bis zu 60cm. Charakteristisch für dieses Johanniskraut sind 2 deutliche Längskanten am Pflanzenstängel entlang.
Die Laubblätter haben eine variable Form von breit-eiförmig bis schmal-linealisch. Die Blätter sind durchsichtig punktiert.
Die goldgelben Blüten erscheinen zwischen Juni und August. Die Blüten bilden eine Trugdolde.